表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组腺病毒的构建

作者: 许晗 ; 李海敏 ; 王爱玲 ; 李春燕 ; 李河林 ; 吕其壮 ; 张彦明 ; 郭抗抗

关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白侵袭素蛋白C端重组腺病毒

摘要：为研制表达猪圆环病毒2型（PCV-2）Cap蛋白的重组腺病毒疫苗,根据PCV-2ORF2（Cap）基因序列和耶尔森菌侵袭素C端（InvC）序列,克隆获得Cap和InvC基因后,插入pAdShttle-CMV载体构建重组穿梭载体pAdShttle-Cap-InvC,经PmeI线性化后,转化入BJ5183感受态细菌与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-Cap-InvC。重组质粒经PacⅠ线性化后,转染HEK293细胞,连续传代后获得重组腺病毒。应用PCR、Western blot和间接免疫荧光（IFA）技术分别检测重组腺病毒中Cap和InvC基因及表达。结果表明,成功构建了表达PCV-2Cap蛋白和InvC的重组腺病毒rAd-CapInvC,经过噬斑纯化和连续传代,重组腺病毒TCID50可达10-9.32/mL,为PCV-2重组腺病毒活载体疫苗的研发提供了基础材料。

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表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组腺病毒的构建

作者: 许晗 ; 李海敏 ; 王爱玲 ; 李春燕 ; 李河林 ; 吕其壮 ; 张彦明 ; 郭抗抗

关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 侵袭素蛋白C端 重组腺病毒

关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白侵袭素蛋白C端重组腺病毒