柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

作者: 曹利利 [1] ; 姚新华 [1] ; 郭衍冰 [1] ; 王英贺 [1,2] ; 任科研 [1,3] ; 魏峰 [2] ; 苑淑贤 [1]

关键词: 柔嫩艾美耳球虫 SAG2基因卡介苗表达

摘要：为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。

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柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

作者: 曹利利 [1] ; 姚新华 [1] ; 郭衍冰 [1] ; 王英贺 [1,2] ; 任科研 [1,3] ; 魏峰 [2] ; 苑淑贤 [1]

关键词: 柔嫩艾美耳球虫 SAG2基因 卡介苗 表达

关键词: 柔嫩艾美耳球虫 SAG2基因卡介苗表达