- · 【植保学院】多措并举保障留校学生过温馨年[02/18]
- · 【资环学院】举办留校学子新春趣味运动会[02/16]
- · 【信息学院】制作专属微信红包封面[02/13]
- · 【创新学院】新春送祝福温暖学子心[02/12]
- · 【资环学院】新春慰问暖人心 浓浓关爱显真情[02/12]
- · 【学生处】因为有你们才“最美”[02/10]
- · 【园林学院】《中国新疆之历史印记》纪录片引发师生关注[02/08]
- · 【农学院】整合资源引企入教 扎实推进人才培养[02/08]
猪戊型肝炎病毒ORF3基因的克隆与原核表达
作者: 何美琳 [1] ; 张焕容 [1,2] ; 王栋 [1]
关键词: 猪戊型肝炎病毒 ORF3基因 表达
摘要:为了表达猪源戊型肝炎病毒衣壳蛋白,并对其反应原性进行研究,采用RT-PCR方法扩增猪戊型肝炎病毒(SHEV)ORF3完整基因,将扩增产物插入pMD19-T载体,再亚克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建了pET-32a(+)-ORF3表达载体,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,同时对诱导表达条件进行筛选,并用SDS-PAGE和免疫印迹等方法分析鉴定表达产物。结果表明,成功扩增到345bp的目的基因片段,表达载体pET-32a(+)-ORF3转入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,成功表达了ORF3基因编码的蛋白,当IPTG浓度为1mmol/L,诱导时间为6h时,该基因在E.coli BL21(DE3)中表达量最高。表达产物的分子质量约为29.6ku,与预期目的蛋白分子质量相符。表达的蛋白既有包涵体形式,也有可溶性形式。经Western blot检测,表达的目的蛋白能与SHEV阳性血清发生特异性反应。