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E型产气荚膜梭菌ι毒素重组质粒的构建与表达
作者: 黄静 ; 王琳 ; 张括川 ; 刘晓丹 ; 赵宝华
关键词: E型产气荚膜梭菌 ι毒素 构建 表达
摘要：ι毒素是是公认的引起羔羊、犊牛和家兔患肠毒血症的主要毒素,为了减小其给畜牧业带来重大损失,论文就ι毒素蛋白的构建与表达进行研究,以期对其所引起疾病的预防及疫苗的研发提供参考。通过E型产气荚膜梭菌基因组,利用PCR方法获得大小为1 377bp的iota a基因和2 640bp的iota b基因;随后将目的基因同pET-28a质粒连接构建重组载体,并将重组载体转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE、Western blot进行分析,发现Ia、Ib蛋白均成功进行了可溶性表达;最后利用Ni-NTA层析柱对重组蛋白进行纯化,获得了目的蛋白。