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H1和H3亚型禽流感病毒二重PCR检测方法的建立
作者: 郭捷 [1] ; 谢芝勋 [2] ; 彭宜 [2] ; 刘加波 [2] ; 谢志勤 [2] ; 庞耀珊 [2] ; 邓显文 [2] ; 谢丽基 [2]
关键词: 禽流感病毒 H1亚型 H3亚型 二重聚合酶链反应
摘要:为建立简便、快速同时检测H1和H3亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的方法,根据GenBank中H1亚型AIV—HA基因和H3亚型AIV—HA基因的序列,分别设计了2对针对H1AIV和H3AIV的保守基因序列的引物。应用这2对引物对混有H1 AIV和H3AIV的模板进行二重PCR扩增,得到了2个特异性扩增条带,大小与试验设计相符的302bp(H1AIV)和626bp(H3A1V),而对其他亚型AIV和禽呼吸道病原体的PCR扩增结果均为阴性,敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出50pg的H1 AIV模板和26pg的H3 AIV模板。