鸡毒支原体磷酸酶PrpC活性检测

作者: 胡美容 [1,2] ; 陈鸿军 [1] ; 于圣青 [1] ; 仇旭升 [1] ; 谭磊 [1] ; 高崧 [2] ; 丁铲 [1]

关键词: 鸡毒支原体 PrpC 磷酸酶

摘要：HPr激酶/磷酸酶（PrkC/PrpC）系统在细菌和支原体中高度保守,不仅参与糖酵解酶类的磷酸化/去磷酸化,也与毒力、生物被膜等生命活动相关。克隆并突变获得编码鸡毒支原体磷酸酶PrpC的ptc1基因,经原核表达纯化后,利用底物PNPP体外检测其酶活性,并对影响该酶活性的pH、金属离子、温度等影响因子进行分析。结果表明,Ptc1蛋白具有磷酸酶活性,Mn^2＋为该酶辅因子,最适离子浓度为2mol/L,最适pH为8.5,最适温度为37℃。相同浓度的Li^＋、Na^＋、K^＋、Mg^2＋、Ca^2＋、Ba^2＋、Al^3＋、Hg^2＋等金属离子均对表达产物具有不同程度的抑制活性。初步建立了PrpC功能检测体系,为进一步深入研究PrkC/PrpC调节系统奠定基础。

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