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牛病毒性腹泻病毒牦牛分离株E0基因的克隆表达
作者: 叶成玉 [1] ; 王光华 [1] ; 蔡其刚 [1] ; 王戈平 [1] ; 陆艳 [1] ; 张芳芳 [2] ; 马利青 [1] ; 周继章 [2]
关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E0基因 原核表达 抗原性
摘要:将青海牦牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)青海泽库(QHZK)株的E0基因亚克隆入原核表达载体pET-32(a),构建了重组表达载体pET-32(a)-E0,然后用重组质粒转化Rosetta(DE3)感受态细胞,并利用IPTG诱导蛋白表达。表达的蛋白用His-Band镍柱进行亲合层析纯化,Western blot鉴定表达蛋白。结果显示,E0基因可在大肠埃希菌中获得表达,表达产物的分子质量约为44ku,与预期的蛋白分子质量大小一致;Western blot分析表明,该蛋白可以与BVDV标准阳性血清产生特异性结合反应。
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