禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达

摘要：为获得纯化的禽流感病毒（AIV）的NSl蛋白，将A／chicken／Guangxi／10／99（H9N2）（CK／Gx／10／99）NSl全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中，构建了重组转移载体pFastBacHTA—Nsl，然后转化入DHl0Bac感受态细胞中制备重组杆粒，在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞，获得表达NSl基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NSl蛋白的表达，通过SDS—PAGE电泳、Westernblot、间接免疫荧光（IFA）对表达的目标蛋白进行分析。结果表明，构建了含NSl基因的重组杆状病毒，分子质量约30ku的重组蛋白得到了表达，为NSl的相关功能研究奠定了基础。