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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段的克隆及原核表达

作者: 王云龙 [1,2] ; 刘小聪 [1] ; 李玉林 [3] ; 王国强 [3] ; 孙新城 [3] ; 董彩文 [3] ; 程蕾 [3] ; 王继创 [3] ; 邓黎黎 [3] ; 李恒思 [3]

关键词: 肺炎支原体 P1蛋白 套式PCR 原核表达

摘要:根据GenBank公布的肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,Mp)P1蛋白羧基端序列(AF290001.1),设计合成2对特异性引物,采取套式PCR方法,以肺炎支原体培养物中提取的DNA为模板,扩增肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,将其克隆至pET32a表达载体,构建重组质粒pET32a/P1(3802-4695),转化大肠埃希菌BL21-gold,测序验证后IPTG诱导表达,经SDS—PAGE表明重组蛋白表观分子质量与预期一致,可溶性表达产物经Westernblot证实重组蛋白具有免疫反应性。


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