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山羊痘病毒糖蛋白基因ORF112的原核表达及多克隆抗体的制备
作者: 郑敏 [1] ; 李春艳 [2] ; 陆文俊 [1] ; 莫胜兰 [1] ; 屈素洁 [1] ; 粟艳琼 [1] ; 梁媛 [1] ; 施开创 [1] ; 李军 [1]
关键词: 山羊痘病毒 ORF112蛋白 原核表达 多克隆抗体
摘要:为探索山羊痘病毒(GTPV)糖蛋白基因ORF112在疫苗和诊断中的应用,应用PCR技术扩增GTPV弱毒疫苗株AV 41ORF112基因,将其克隆到pET-32a载体,转化感受态细胞BL21,经IPTG诱导后获得与预期大小相符的约37ku的融合蛋白,为可溶性和包涵体表达。应用镍离子亲和树脂对可溶性表达的目的蛋白进行纯化,然后用纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体。免疫荧光试验表明该多克隆抗体可以与GTPV反应,为GTPV新型疫苗和诊断试剂的研究奠定了基础。
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