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酵母双杂交筛选人白细胞文库中与A型流感病毒PB1-F2相互作用的蛋白
作者: 崔雨明 [1,2] ; 侯佩莉 [2] ; 张茂林 [2] ; 李鸿梅 [1] ; 黄飞 [2] ; 关振宏 [2]
关键词: 酵母双杂交 A型流感病毒 PB1-F2蛋白 蛋白质相互作用
摘要:利用酵母双杂交技术筛选白细胞文库中与A型流感病毒PB1-F2相互作用的宿主蛋白,为研究PB1-F2蛋白的功能提供依据。构建pGBKT7-PB1-F2诱饵重组载体,在证实诱饵蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛选人白细胞文库中与PB1-F2相互作用的细胞蛋白。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析,并在酵母细胞内验证蛋白的相互作用。Western blot结果表明,酵母表达载体pGBKT7-PB1-F2在酵母中成功表达PB1-F2融合蛋白。酵母双杂交筛选并验证,获得了8个与流感病毒PB1-F2蛋白相互作用的宿主蛋白。本研究有助于在分子水平上探索PB1-F2蛋白的新功能,为揭示流感病毒的致病机理奠定基础。
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