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犬细粒棘球绦虫粪抗原夹心ELISA检测方法的建立
作者: 张旭 [1] ; 古努尔·吐尔逊 [1] ; 米晓云 [1] ; 石保新 [1] ; 张睿 [2] ; 巫剑 [1] ; 赵莉 [1] ; 阿布力克木 [3] ; 张玲 [3] ; 丁晓玲 [3] ; 阿布力兹 [3] ; 李国庆 [4] ; 卡那提拜克·开比热 [5] ; 张壮志 [1]
关键词: 细粒棘球绦虫 粪抗原 双抗夹心ELISA 特异性 敏感性
摘要：为建立特异性和敏感性高的检验犬细粒棘球绦虫感染的方法。用细粒棘球绦虫（简称,Eg）成虫抗原分别免疫兔和绵羊,收集高免血清,纯化的高免抗体。依据抗体夹心ELISA工作原理,以兔抗体包被,检测感染Eg、不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,绵羊抗体扑捉抗原,HRP标记兔抗绵羊IgG（1∶8 000）催化显色,用酶标仪测定OD 405nm吸光度,用以确定其特异性和敏感性。试验结果表明,敏感性为82.69%（43/52）,特异性为85.88%（140/163）;粪抗原在感染细粒棘球绦虫16d后可检出,最低抗原浓度为9.7ng/mL即犬感染5条成虫时可检测出阳性。该检测方法具有较好的特异性和灵敏性,为进一步研制检测细粒棘球绦虫虫体抗原ELISA检测试剂盒奠定了基础。