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猪瘟病毒石门株E2蛋白在杆状病毒系统中的表达
作者: 周向阳 [1] ; 万婧 [1] ; 廖迅 [2] ; 朱竹君 [1] ; 陈晓玮 [1] ; 刘菲芬 [1] ; 方维焕 [2]
关键词: 猪瘟病毒 E2囊膜糖蛋白 杆状病毒表达系统
摘要:以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达猪瘟病毒(CSFV)石门株的E2蛋白,将CSFV石门株的E2囊膜糖蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,获得重组转移质粒pFastBacHTA-E2。转化大肠埃希菌DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,获得重组病毒。传毒3代后对表达蛋白进行Western blot和间接免疫荧光试验检测。结果显示,E2蛋白获得高效表达,能被抗E2蛋白的单克隆抗体2B10和6×His-单克隆抗体特异性识别,表明CSFV石门株E2囊膜糖蛋白在Sf9昆虫细胞中得到成功表达,具有良好的抗原反应性。
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