鸡传染性法氏囊病病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

作者: 孙洁 [1,3] ; 卢体康 [1] ; 曾少灵 [1,3] ; 杨俊兴 [1,3] ; 詹爱军 [2] ; 林庆燕 [1] ; 曹琛福 [1] ; 陈兵 [1] ; 廖立珊 [1] ; 阮周曦 [1] ; 陶虹 [1] ; 张彩虹 [1] ; 刘建利 [1] ; 花群义 [1,3] ; 吕建强 [1,3] ; 秦智锋 [1,2,3]

关键词: 传染性法氏囊病常规RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 快速检测

摘要：鸡传染性法氏囊病（IBD）是危害我国养禽业的主要疫病之一,呈世界性分布,对养鸡业造成重大危害。在国际种禽贸易中,对IBDV检测是口岸检疫的主要对象之一。为了建立标准的鸡传染性法氏囊病病毒分子检测方法,采用世界动物卫生组织（OIE）推荐的带有通用引物和酶切位点的特异性引物,通过对6株不同毒株的反复试验,优化了针对A片段VP2基因的常规反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测方法（IBDV-VP2（604）-RT-PCR）和针对B片段VP1基因的RT-PCR检测方法（IBDV-VP1（642）-RT-PCR）;针对A片段VP2基因设计特异性引物和探针,建立了优化IBDV特异性实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（rRT-PCR）检测方法（IBDV-VP2-rRT-PCR）。将传染性法氏囊病疫苗-法倍灵（IBDV-BLEN）疫苗株进行系列稀释,两种RT-PCR检测方法的灵敏度均为10-3,而IBDV-VP2-rRT-PCR检测方法灵敏度为10-4。所建立的三种分子生物学检测方法特异,与其他家禽病毒无任何交叉反应。通过对自2007年以来18批221份田间样品检测表明,所建立的方法准确可靠,适合对鸡传染性法氏囊病病毒进行快速灵敏检测和监测。

上一篇：非洲马瘟病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
下一篇：H7N9亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

鸡传染性法氏囊病病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

作者: 孙洁 [1,3] ; 卢体康 [1] ; 曾少灵 [1,3] ; 杨俊兴 [1,3] ; 詹爱军 [2] ; 林庆燕 [1] ; 曹琛福 [1] ; 陈兵 [1] ; 廖立珊 [1] ; 阮周曦 [1] ; 陶虹 [1] ; 张彩虹 [1] ; 刘建利 [1] ; 花群义 [1,3] ; 吕建强 [1,3] ; 秦智锋 [1,2,3]

关键词: 传染性法氏囊病 常规RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 快速检测

关键词: 传染性法氏囊病常规RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 快速检测