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猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备及鉴定
作者: 唐娜 [1,2] ; 王金良 [1] ; 张春玲 [3] ; 董林 [1] ; 祖立闯 [3] ; 曲光刚 [1] ; 谢金文 [1] ; 张松林 [1] ; 柳增善 [3] ; 沈志强 [1]
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 特性鉴定
摘要：将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV ）经密度梯度离心纯化后免疫Balb/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，间接ELISA筛选能稳定分泌抗PRRSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并对制备出的单克隆抗体进行生物学与免疫学特性鉴定。结果成功筛选出3株能分泌IgG型单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为6A4、3F1和7F2。3株抗体均表现良好的特异性，ELISA方法检测与其他病毒及Marc-145细胞培养物无交叉反应，免疫荧光染色试验表明3株单克隆抗体均可不同程度地识别细胞中的病毒而呈现特异性荧光。Western blot说明6A4、7F2能够分别特异性识别25 ku和15 ku蛋白。试验初步表明6A4、3F1具有中和抗体活性，7F2不具有抗体依赖性增强（antibody dependent enhancement ，ADE）作用，但可以应用于PRRSV N蛋白检测。