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牛γ干扰素在CHO细胞中的表达和鉴定
作者: 冯向辉 [1] ; 李文合 [2] ; 孙明 [1] ; 刘巧荣 [1] ; 乔明明 [1] ; 申屠芬琴 [1] ; 杨璐 [1] ; 陈西钊 [1]
关键词: 牛γ干扰素 表达 CHO细胞
摘要：为获得高活性的牛γ干扰素（BoIFN-γ），依据GenBank中已发表的BoIFN-γ基因序列（M29867）进行人工合成，应用PCR方法扩增该基因，将其插入pIRESneo构建真核表达质粒，转染到CHO细胞中，用SDS—PAGE和Westernblot鉴定目的蛋白的表达，并用牛7干扰素检测试剂盒鉴定其反应原性。结果：成功的构建了pIRES—BoIFN-γ真核表达载体，实现了其在CHO细胞上的表达。表达产物经γ-干扰素检测试剂盒检测具有良好的反应原性，为研究BoIFN-γ结构与生物学功能以及建立牛结核BoIFN-γ检测法奠定了基础。