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网状内皮组织增生症病毒改良型LAMP检测方法的建立
作者: 曾婷婷 ; 谢芝勋 ; 谢丽基 ; 刘加波 ; 庞耀珊 ; 范晴 ; 罗思思 ; 邓显文 ; 谢志勤
关键词: 网状内皮组织增生症病毒 改良型环介导等温扩增 可视化检测 加速引物
摘要:根据网状内皮组织增生症病毒的基因,设计一套环介导等温扩增LAMP)引物,在此基础上加入一条加速引物,进行LAMP反应,优化反应条件,进行特异性和敏感性试验,同时与不加入加速引物的体系比较其敏感性。经过反应条件优化,可通过肉眼观察颜色直接判定结果,在1h内完成整个反应,改良型LAMP检测的敏感性最低达到7fg,是普通PCR方法的200倍,对其他常见免疫抑制性病原体的检测结果均为阴性。本试验建立的检测网状内皮组织增生症病毒的改良型LAMP方法,具有良好的特异性和敏感性,可以在短时间内检测网状内皮组织增生症病毒,在基层兽医工作中具有良好的诊断应用价值。
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