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鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定
作者: 柴顺秀 ; 马花 ; 韩英 ; 赵隆寿
关键词: 鸭坦布苏病毒 E蛋白 原核表达 鉴定
摘要:根据GenBank中发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)基因序列,设计合成一对特异性引物,RT-PCR扩增966bp E基因片段并克隆至pMD18-T载体中,经鉴定正确后,将其定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组阳性质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,Western blot检测证明该重组蛋白可与抗血清发生反应。