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短小乳杆菌重组S-层蛋白质的纯化及其体外黏附性的初步鉴定
作者: 王彩凤 ; 敖敦格日勒 ; 小琴 ; 特尼格尔 ; 赵慧 ; 格日勒图
关键词: 短小乳杆菌 重组S-层蛋白质 纯化 体外 黏附特性
摘要：以本实验室已构建的pMD19T-slp为模板,应用PCR方法亚克隆slp基因,将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP并用LiCl的方法进行纯化。应用SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定,应用ELISA方法鉴定重组融合蛋白的体外黏附特性。在大肠埃希菌裂解样品中,SDS-PAGE和Western blot结果均证明分子质量大小约为71ku的重组融合蛋白GST-SLP的存在;ELISA结果提示,该重组融合蛋白在体外能够有效地黏附在乳酸乳球菌NZ9000表面。本试验为S-层蛋白质生物学特性的进一步研究奠定了基础。