嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统AscV基因的检测与序列分析

摘要：对分离于草鱼、青鱼、鲤鱼、牙鲆、宽体金线蛭、中国林蛙的致病性嗜水气单胞菌（Aeromonas hy-drophila）,进行Ⅲ型分泌系统（typeⅢsecretion system,TTSS）AscV基因的检测与分析,探讨不同来源嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统AscV基因的携带与分布情况。利用文献发表的TTSS的AscV基因特异性引物,采用PCR方法扩增该基因片段,选取代表菌株的AscV基因序列,以DNA Star软件与GenBank公布的参考菌株相应基因序列进行同源性比较,构建系统进化树。结果在供试的42株菌中,有34株携带（阳性率80.95%）;其中分离于宽体金线蛭的10株有8株携带（阳性率80%）、中国林蛙的11株有10株携带（阳性率90.9%）、牙鲆的10株有9株携带（阳性率90%）、草鱼的7株有3株携带（阳性率42.9%）、青鱼和鲤鱼的各2株均携带（阳性率100%）。所检测的5个代表菌株AscV基因与参考菌株的同源性在81.0%～98.7%之间;供试不同来源菌株之间的同源性在91.2%～99.3%之间。