羊附红细胞体单管套式PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：为了建立绒山羊附红细胞体单管套式PCR检测方法，根据GenBank上发表的羊附红细胞体16SrRNA基因序列，设计内、外2对特异性引物，建立单管套式PCR方法，同时进行了特异性、敏感性试验及临床检测。结果表明，本检测方法能够扩增基因片段大小为681bp，与GenBank收录的相关序列同源性为97．69／6～99．2％，而与牛温氏附红细胞体、猪附红细胞体、绵羊肺炎支原体、猪肺炎支原体、大肠埃希菌相关病原基因组均无交叉反应，能够检测出DNA的最小量为14．8fg。对74份临床样品进行了检测，阳性率为43．2％，高于常规PCR和血涂片镜检测结果，表明本检测方法具有较高的敏感性，可用于羊附红细胞体感染的早期诊断，有较高的临床应用价值。