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嗜酸性乳杆菌MG株S层蛋白的高级结构预测分析及原核表达
作者: 王敏 [1] ; 小琴 [1] ; 那日苏 [1,2] ; 王彩凤 [1] ; 特尼格尔 [1] ; 赵慧 [1] ; 格日勒图 [1]
关键词: 嗜酸性乳杆菌MG株 S层蛋白 高级结构预测 原核表达
摘要:以嗜酸性乳杆菌MG株sip基因(表达S层蛋白的基因)为材料,应用Oenetyx软件推导出其正确的开放阅读框(ORF),并用CPHmodels,Swiss-Model和Swiss—PdbViewer生物软件预测SI,P蛋白质的高级结构;此外,构建sip基因的原核表达载体pGEX—sip,经IPTG诱导后‘成功表达出重组S层蛋白(S—layerprotein,SLP),并进行SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果表明,使用3种不同的软件预测SI.P蛋白质的高级结构,预测结果具有很高的相似性,其中a螺旋占3.33%,线性结构占45%,无规则卷曲占51.67%,平均亲水值为一0.262,亲水氨基酸比例为59.19/5;表达载体pGEX—sip在E.coliBL21中经IPTG诱导成功表达出重组SLP蛋白,其GST融合蛋白的大小约为70ku。本研究结果为进一步以SLP为材料的生物制品的制备和应用开发奠定了基础。
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