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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的表达及其促淋巴细胞增殖活性测定

作者: 崔美实 [1] ; 乔薪瑗 [1] ; 唐丽杰 [1] ; 葛俊伟 [1] ; 王瑞翀 [2] ; 姜艳平 [1] ; 崔文 [1] ; 李一经 [1]

关键词: 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 可溶性表达 生物学活性

摘要:根据GenBank上公布的猪粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(pGM—CSF)基因序列(U67175.1)扩增该基因,克隆至pET30b载体,构建重组表达载体pET30b-pGM-CSF,并与分子伴侣辅助质粒pG—KJE8共同转化EcoliBL21(DE3),经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE分析,可见表达的目的蛋白大小约为23ku,主要以包涵体形式存在,且在分子伴侣的辅助下,增大了可溶性蛋白的表达量。经镍离子亲和层析纯化后,通过淋巴细胞增殖试验初步检测了pGM—CSF蛋白促进淋巴细胞增殖的活性。结果表明,猪GM—CSF具有明显的体外刺激淋巴细胞增殖的生物学活性,为进一步研究猪GM—CSF的生物学功能以及临床应用奠定了基础。


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