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猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测方法的建立
作者: 吴忆春
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N基因 实时荧光定量PCR
摘要：为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）SYBRGreen工实时荧光定量PCR检测方法，采用Rrr_PCR扩增PRRSVN基因266bp片段，并克隆到pMD18-T载体中，以纯化的重组质粒为模板进行荧光定量PCR扩增，建立了PRRSV荧光定量PCR检测方法，该方法检测灵敏度可达1．3×10^1拷贝／μL，与猪瘟病毒（CSFV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪日本脑炎病毒（JEV）均不发生交叉反应，具有很好的特异性和重复性。结果表明，建立的PRRSV实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于临床猪繁殖与呼吸综合征病毒病（PRRS）的诊断。
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