布鲁菌二氢硫辛酰胺脱氢酶的原核表达

作者: 关团 ; 张辉 ; 王震 ; 孙志华 ; 刘娟 ; 韩玉霞 ; 王文华 ; 江雅丽 ; 陈创夫

关键词: 布鲁菌二氢硫辛酞胺脱氢酶克隆原核表达

摘要：以羊种布鲁菌043株基因组为模板,利用PCR扩增二氢硫辛酰胺脱氢酶（BMEI0145）基因,连接pMD18-T载体后测序,将测序正确的基因片段经双酶切后克隆至pET-28a载体中,转化大肠埃希菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果显示,成功克隆了BMEI0145基因,片段大小为1 404bp;SDS-PAGE显示,BMEI0145蛋白分子质量约为62ku;Western blot分析显示,BMEI0145蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。表明成功获得了BMEI 0145蛋白,该蛋白具有与布鲁菌自身蛋白相同的抗原性,为进一步研究布鲁菌基因工程疫苗和布鲁菌病的诊断奠定了基础。

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布鲁菌二氢硫辛酰胺脱氢酶的原核表达

作者: 关团 ; 张辉 ; 王震 ; 孙志华 ; 刘娟 ; 韩玉霞 ; 王文华 ; 江雅丽 ; 陈创夫

关键词: 布鲁菌 二氢硫辛酞胺脱氢酶 克隆 原核表达

关键词: 布鲁菌二氢硫辛酞胺脱氢酶克隆原核表达