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引起猪腹泻的病毒分离鉴定
作者: 林庆燕 [1] ; 陈书琨 [1] ; 孙洁 [1] ; 唐金明 [1,2] ; 陈兵 [1] ; 卢体康 [1] ; 刘建利 [1] ; 廖立珊 [1] ; 曾少灵 [1] ; 祁振强 [3] ; 阮周曦 [1] ; 吕建强 [1] ; 杨俊兴 [1] ; 曹琛福 [1] ; 张彩虹 [1] ; 花群义 [1] ; 秦智锋 [1]
关键词: 猪流行性腹泻病毒 分离纯化 流行病学调查
摘要：为了对近年来引起仔猪腹泻的主要病毒进行分离鉴定,进而为疫苗的研发奠定基础,自2011年开始,从华南地区猪场连续3年检测出多个引起猪腹泻症状的病毒。其中2011年采用MA-104细胞系从临床样品小肠内容物中分离到猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪轮状病毒A（PRoVA）,临床样品为2种病毒的混合感染。2012年分离到PEDV、PRoVA和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）3种病毒,临床样品为3种病毒混合感染。2013年从临床样品中只分离到PEDV 1种病毒。通过在Vero-76传代细胞系中前3代加入胰酶和猪胰酶,自第4代仅加入胰酶的方法,成功克服了PEDV的细胞毒性,实现了连续传代,并在第8代出现了细胞病变（CPE）。通过采用IgY抗体对PEDV和PRoVA混合感染的MA-104细胞培养液连续中和和传代,成功分离纯化到猪轮状病毒A。对9个猪场的3年猪腹泻病毒性疾病流行病学调查表明,2011年—2013年主要是以PED流行为主。