猪葡萄球菌脱落毒素Exh C基因的克隆及原核表达

摘要：为研究猪葡萄球菌表皮脱毒素 Exh C 基因的分子特征及其原核表达产物的免疫学活性，利用PCR 技术从猪葡萄球菌广东增城分离株（GDZC 株）扩增出表皮脱落毒素 Exh C 基因，测序与序列比较分析显示，其编码区全长为837 bp，编码279个氨基酸，与国内外猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌表皮脱落毒素 Exh C 基因的核苷酸同源性、氨基酸同源性均为100％。将 Exh C 基因克隆于 pET-28a （＋）表达载体中，经测序正确后，重组质粒转入大肠埃希菌 BL21（DE3）进行诱导表达，表达产物经 SDS-PAGE 鉴定和 Western blot分析。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在，其分子质量大小约为32 ku，与预期大小一致。Western blot 分析表明，Exh C 重组蛋白能与猪葡萄球菌 GDZC 株的阳性血清发生特异性反应，说明表达的 GDZC株 Exh C 重组蛋白具有良好的免疫学活性。