虎源传染性鼻气管炎病毒gD基因重组真核表达载体的构建

作者: 张晓明 [1] ; 胡俊 [1] ; 彭仕明 [2] ; 陈武 [2]

关键词: 虎源传染性鼻气管炎病毒 gD基因聚合酶链反应真核表达

摘要：根据从虎气管组织扩增获得的猫传染性鼻气管炎病毒相关核酸序列，设计扩增编码虎源猫传染性鼻气管炎病毒 gD 蛋白基因片段的引物，通过 PCR 扩增出 gD 基因片段，并成功插入到 pMD18-T Sim-ple 载体中，筛选获得重组质粒，命名为18T-gD。重组质粒通过 Hin d Ⅲ和 Xho Ⅰ酶切后，插入 pcDNA 3．1（＋）真核表达载体构建出 gD 基因的重组真核表达质粒 pcDNA-gD。用脂质体将重组真核表达质粒 pcD-NA-gD 转染293T 细胞，通过 RT-PCR 和 Western blot 检测，结果显示 gD 基因在真核细胞中得到正确转录和表达，所表达蛋白分子质量约为42．29 ku，为虎源猫传染性鼻气管炎基因疫苗的研究奠定了基础。

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虎源传染性鼻气管炎病毒gD基因重组真核表达载体的构建

作者: 张晓明 [1] ; 胡俊 [1] ; 彭仕明 [2] ; 陈武 [2]

关键词: 虎源传染性鼻气管炎病毒 gD基因 聚合酶链反应 真核表达

关键词: 虎源传染性鼻气管炎病毒 gD基因聚合酶链反应真核表达