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猪瘟病毒酵母双杂交pGBKT7-NS3诱饵载体的构建与鉴定
作者: 宋江伟 ; 田宏 ; 吴锦艳 ; 陈妍 ; 尚佑军 ; 刘湘涛
关键词: 猪瘟病毒 NS3蛋白 酵母双杂交系统 诱饵载体
摘要：利用RT-PCR技术扩增获得猪瘟病毒NS3基因片段,将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,经酶切,测序验证其正确插入后,将重组诱饵质粒转化酵母菌Y2HGold,检测其在酵母中毒性和自我激活作用,并利用Western blot分析诱饵载体在酵母中的转化情况。结果表明,pGBKT7-NS3诱饵载体在Y2HGold酵母细胞中可以表达,此载体在酵母细胞Y2HGold中无毒性和自我激活能力,研究结果为使用酵母双杂交技术筛选相互作用蛋白奠定了基础。