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罗非鱼hepcidin 1-5成熟肽在毕赤酵母中的表达和活性研究
作者: 梁盈 [1] ; 梁瑞 [1] ; 张永安 [2] ; 祁克宗 [1] ; 涂健 [1] ; 彭开松 [1,2]
关键词: 罗非鱼hepcidin 酵母表达 斑点-酶联免疫吸附试验 抑菌活性 淋巴细胞增殖
摘要:为获得重组酵母分泌表达的莫桑比克罗非鱼hepcidin并进行其功能研究,将罗非鱼hepcidin 1-5(TH1-5)成熟肽cDNA插入表达载体pPIC9K,获得重组分泌表达质粒pPIC9K-TH1-5,电转化毕赤酵母GS115,阳性克隆经甲醇诱导获得表达上清;表达上清冻干品经Dot-ELISA检测,并分析了表达产物对指示菌和鸡外周血淋巴细胞的影响。结果表明,TH1-5成熟肽可通过表达质粒pPIC9K在毕赤酵母中实现分泌型表达,Dot-ELISA检测表达上清中含有TH1-5。重组表达的TH1-5对大肠埃希菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、粪肠球菌(ATCC29212)具有明显的抑菌活性;含重组表达TH1-5的上清冻干品(6.25mg/mL)可协同ConA(0.125μg/mL)或LPS(0.125μg/mL)促进鸡外周血淋巴细胞的增殖。
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