共表达口蹄疫病毒VP1-2A基因与猪IL-2重组腺病毒的构建及其免疫效果研究

摘要：构建共表达口蹄疫病毒（FMDV） VP1-2A基因和猪白细胞介素2（IL-2）基因的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响.将FMDV VP1-2A基因和猪IL-2基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中,在受体菌中与腺病毒骨架载体pAdenoVatorAE1/E3同源重组.重组腺病毒质粒转染HEK-293A细胞,得到重组腺病毒rAd5VP1-2A-Po IL-2.MTT法检测重组IL-2的生物活性.用rAd5VP1-2A-poIL-2免疫接种小鼠,同时设免疫单独表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5VP1和空腺病毒的对照组.通过检测淋巴细胞增殖功能,特异性抗体分泌,IL-4和IFN-γ的表达水平衡量rAd5VP1-2A-poIL-2对小鼠特异性免疫应答的影响.结果显示,成功获得了rAd5VP1-2A-poIL-2,MTT法检测重组IL-2具有生物学活性.小鼠免疫试验结果显示,与rAd5VP1免疫组相比,rAd5VP1-2A-poIL-2免疫既能增强重组病毒诱导小鼠淋巴细胞增殖的能力,又能提高重组病毒诱导小鼠特异性抗体的水平.细胞因子检测结果显示,串联IL-2能促进重组病毒诱导Th1和Th2的分化.研究结果说明,rAd5VP1-2A-poIL-2可望成为口蹄疫的候选疫苗.