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牛流行热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立
作者: 廖承球 ; 周庆丰 ; 陈俊伟 ; 潘永飞 ; 卢围 ; 王东东 ; 蔡新斌 ; 宋延华
关键词: 牛流行热病毒 一步法RT-PCR 建立
摘要:根据NCBI上公布的牛流行热病毒G基因序列设计、合成了一对检测牛流行热病毒G基因的RT-PCR引物,以牛流行热疫苗为模板,建立了牛流行热的RT-PCR检测方法,经扩增得到大小799 bp的片段.该方法具有良好的特异性、敏感性,能扩增出含量为9.576 pg的BEFV RNA.从17份疑似牛流行热病毒感染的牛全血中检测出阳性病例5份,经测序后证明为牛流行热病毒G基因片段.结果表明,建立的一步法RT-PCR方法简便易行,可用于牛流行热的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查.