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布鲁菌外膜蛋白Bp26在大肠埃希菌中的可溶性表达
作者: 刘晓颖 ; 姚志利 ; 陈立志 ; 廉士珍 ; 夏小成 ; 冯二凯
关键词: 布鲁茵菌 外膜蛋白Bp26 乳糖 大肠埃希菌 表达
摘要:为了获得布鲁菌外膜蛋白Bp26活性重组蛋白,以布鲁菌M5株菌体DNA为模板,应用PCR方法扩增得到Bp26基因,将该基因片段克隆到载体pET28a中,转化到E.coliBL21(DE3)中,在不同条件下诱导表达,对获得的菌体细胞超声破碎,通过SDS-PAGE鉴定是否为可溶性表达。结果表明,pET28a-Bp26重组质粒构建成功;终浓度为1.0mmol/L的IPTG在37℃下诱导,重组蛋白表达量最大;含乳糖成分的zYM-5052培养基和终浓度为1.0mmol/L的IPTG在相同条件下诱导表达蛋白,ZYM-5052培养基可以更好的获得可溶性表达蛋白,为进一步利用大肠埃希菌系统表达生产高活性重组Bp26蛋白提供了一定的参考依据。