重组T7噬菌体生物学特性的研究

摘要：以大肠埃希菌BL21为宿主菌研究重组T7噬菌体生物学特性。将构建好的重组T7噬菌体扩增纯化，分析其对PH、温度及离子浓度的敏感性，并将重组噬菌体与宿主菌以不同比例混合测定最佳感染复数并绘制其一步生长曲线。结果表明，重组T7噬菌体的热稳定性较弱，在60℃时20min效价明显下降，在70℃时5min内即会全部失活；PH4～11的范围内重组T7噬菌体均可稳定存在；培养基中Mg件浓度为10mmol／L及Ca2＋浓度为5mmol／L时最有利于噬斑的形成，出斑率提高了约20％；重组噬菌体感染其宿主大肠埃希菌的最佳感染复数为10-5；其一步生长曲线的潜伏期约30min，裂解期约150min，裂解量为126pfu／cell。构建的重组T7噬菌体具有较强的裂解能力，潜伏期短，裂解量大，对理化因素稳定性好，为进一步大规模、高效率制造口蹄疫表位疫苗提供了理论基础。