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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

O型口蹄疫病毒Real-timePCR检测方法的建立

作者: 胡骑 ; 信爱国 ; 李华春

关键词: 口蹄疫病毒 实时荧光定量PCR 大通量检测

摘要:为建立一种可以快速、准确检测0型口蹄疫病毒的TaqMan荧光定量PCR方法,根据O型口蹄疫病毒VP1基因保守区序列设计特异性引物和TaqMan探针,使用MagMaxExpress核酸自动提取系统提取O型口蹄疫病毒EMD/O/YM/YN/2000株病毒核酸,建立了检测O型口蹄疫病毒的实时荧光定量PCR方法。该方法标准曲线相关系数达0.9993,最低检测量达到1.79个拷贝,比传统荧光定量PCR方法灵敏10倍以上,特异性强。该方法可以在2.5h内检测96份临床样品,相对于传统荧光定量PCR方法,效率提高2倍以上。采用MagMaxExpress核酸自动提取系统配合7500Fastreal—timePCRsystem建立的方法可以实现快速、准确检测O型口蹄疫病毒。


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