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猪萨佩罗病毒YC2011株1D基因的克隆及原核表达
作者: 陈俊伟 [1] ; 张祥斌 [2] ; 张云静 [3] ; 周庆丰 [1] ; 宋延华 [1] ; 李薇 [1] ; 陈峰 [2] ; 薛春宜 [3] ; 毕英佐 [2] ; 曹永长 [3]
关键词: 猪萨佩罗病毒 1D基因 原核表达
摘要：为研发猪萨佩罗病毒（PSV）检测试剂，根据PSVYC2011毒株核苷酸序列，设计针对1D基因的特异引物，以YC2011毒株为模板，利用RT—PCR方法，成功扩增出1D基因，将该基因与原核表达载体pET-32a（＋）连接，转化表达菌株BL21。经PCR和测序鉴定，阳性菌株IPTG诱导表达，融合蛋白1D进行SDS—PAGE和Westernblot检测分析。结果表明，成功构建了原核表达菌株，其所表达的融合蛋白分子质量约为51ku，且可被猪萨佩罗病毒阳性血清所识别。