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禽流感病毒H9和N2亚型双重RT-PCR检测方法的建立
作者: 徐倩 [1] ; 谢芝勋 [2] ; 谢丽基 [2] ; 邓显文 [2] ; 谢志勤 [2] ; 罗思思 [2] ; 黄莉 [2] ; 黄娇玲 [2] ; 曾婷婷 [2]
关键词: 禽流感病毒 H9亚型 N2亚型 双重逆转录-聚合酶链反应
摘要:为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据AIV H9亚型和N2亚型基因序列,分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物,建立了H9亚型和N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT-PCR扩增,可得到545bp H9基因特异性条带和341bp N2基因的特异性条带;对非H9亚型的N2亚型AIV进行扩增,则仅出现1个特异性扩增条带,即341bp N2基因条带;对非H9或N2亚型AIV和其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。结果表明该双重RT-PCR最低能检出100fg H9N2亚型AIV的cDNA模板。
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