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杨凌某羊场羊口疮病毒的分离鉴定
作者: 张瑜 ; 高晶晖 ; 张立强 ; 高洋 ; 贾云晓 ; 陈德坤
关键词: 羊口疮病毒 PCR检测 犊牛睾丸原代细胞 分离 鉴定
摘要：为获得杨凌地区羊口疮病毒野毒株,在某羊场采集具有典型羊口疮症状的病羊口唇部结痂并研磨,无菌过滤后取500μL接种于犊牛睾丸原代细胞。盲传4代,测定细胞病变的第5代病毒的滴度,用羊口疮病毒B2L和F1L基因的特异性引物进行PCR检测。结果显示,第5代病毒能够致犊牛睾丸原代细胞出现细胞病变（CPE）,病毒滴度为10^7.66 TCID50/mL;扩增出了羊口疮病毒B2L和F1L基因的片段,其大小分别为540bp和437bp,与用于设计引物的参考毒株序列的相似度分别为96.57%和96.43%,可确定为羊口疮病毒的相应基因片段,获得了羊口疮病毒分离株。