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    《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领域的最新研究进展、科技成果以及新技术和新方法,基础与临床兼顾。为月刊,A4开本,136页,每月20日 ...

口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建

作者: 苗书魁 [1] 魏玉荣 [1] 魏婕 [1] 米晓云 [1] 汪萍 [1] 马文戈 [1] 王延 [2] 薛英

关键词: 口蹄疫病毒 全长cDNA 转染 病毒拯救

摘要:为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)的感染性克隆,采用 RT-PCR将 O型 FMDV OHM/02株全长基因组分为5个重叠的片段进行扩增,克隆至载体 pUC57中,获得全长 cDNA克隆 pPO-1.将线性化的pPO-1与含有编码 T7 RNA 聚合酶的真核表达重组质粒共转染 BHK-21细胞,出现致细胞病变效应(CPE).对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切、测序,表明人工设计的分子标记B am HⅠ酶切位点消失,排除了亲本毒株污染的可能性.间接免疫荧光试验可以检测到绿色荧光,电镜观察可观察到病毒粒子,表明构建了具有感染性的 OHM/02毒株全长 cDNA克隆.病毒生长曲线表明,拯救病毒与亲本病毒的复制能力和增殖特性相似.OHM/02株全长 cDNA感染性克隆的构建及拯救可为FMDV致病机理的研究提供一种重要工具,可促进疫苗的研发.


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