利用电穿孔法对狂犬病病毒SRV9Ψ区缺失株病毒的拯救及鉴定

作者: 毛丽萍魏玉圆王伟翟少华程瑶文兆海简子健

关键词: 狂犬病病毒电穿孔转染法 SRV9Ψ区缺失株拯救

摘要：探讨电穿孔转染法对SRV9Ψ区缺失株重组病毒的拯救及鉴定.利用电穿孔细胞转染法,将纯化的Ψ区缺失株pcDNA-NPMG-L全长质粒和pcDNA-N、pcDNA-P、pcDNA-M、pcDNA-G和pcDNA-L辅助表达质粒共转染至BHK-21细胞中,并进行盲传,借助RT-PCR、间接免疫荧光试验、Western-blot及透射电子显微镜对重组病毒进行鉴定.结果显示,重组病毒能够产生绿色荧光,透射电子显微镜观察可见典型的弹状病毒,对重组毒株与亲本毒株G蛋白进行Western-blot验证,可获得相应目的条带.结果表明,通过电穿孔细胞转染法,能成功拯救出重组病毒SRV9Ψ区缺失株,为病毒的拯救提供新的转染方法,并能有效提高转染效率,为研发新型狂犬病疫苗提供参考.

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利用电穿孔法对狂犬病病毒SRV9Ψ区缺失株病毒的拯救及鉴定

作者: 毛丽萍 魏玉圆 王伟 翟少华 程瑶 文兆海 简子健

关键词: 狂犬病病毒 电穿孔转染法 SRV9Ψ区缺失株 拯救

作者: 毛丽萍魏玉圆王伟翟少华程瑶文兆海简子健

关键词: 狂犬病病毒电穿孔转染法 SRV9Ψ区缺失株拯救