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柔嫩艾美耳球虫两种表面抗原基因的原核表达与鉴定
作者: 陈会亚 费陈忠 杨帆帆 王霄旸 薛飞群 中国农业科学院上海兽医研究所/中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫病学重点开放实验室 上海200241
关键词: 柔嫩艾美耳球虫 表面抗原 原核表达
摘要：为进一步研究柔嫩艾美耳球虫表面抗原蛋白，应用RT—PCR从柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子总RNA扩增表面抗原基因SAG19（Q70CD0）和SAGfm（U6L233），与pGEM—Teasy载体连接，扩增目的片段后分别双酶切扩增产物与pET-28a（＋），连接转化至BL21后，诱导表达，分别获得两种重组蛋白。SDS—PAGE结果表明，两种重组蛋白的分子质量均为32ku，为包涵体蛋白形式。分别以感染柔嫩艾美耳球虫的鸡血清和重组蛋白免疫新西兰大白兔获得的多克隆抗体作为一抗，经Western blot分析，结果表明重组蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。通过对这两种表面抗原基因的研究，为基因工程疫苗的研究提供一定的理论依据。