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无乳链球菌荚膜多糖的粗提及多糖含量测定条件优化
作者: 张哲 杨峰 李新圃 罗金印 刘龙海 李宏胜 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业部兽用药物创制重点室/甘肃省新兽药工程重点实验室 甘肃兰州730050 甘肃农业大学动物医学院 甘肃兰州730070
关键词: 无乳链球菌 荚膜多糖 苯酚-硫酸法
摘要：为提取无乳链球菌荚膜多糖，并对苯酚一硫酸法测定多糖含量条件进行优化。离心收集发酵上清液，超滤浓缩，经800mL／L乙醇沉淀提取无乳链球菌荚膜多糖；采用单因素试验对苯酚硫酸法测定条件进行优化，并对测定方法的可靠性进行验证。结果表明，从1L发酵液中提取到含量为38．51％的荚膜多糖O．36g；测定的最佳条件为：2mL样品液中，加入1mL50mL／L的苯酚，5mL浓硫酸，混匀后80℃作用20min，在1．5h内测定485nm处的光密度。在该条件下，平均加样回收率为99．96％，相对标准偏差为0．40％。说明从无乳链球菌发酵上清液中成功提取到荚膜多糖，建立了苯酚硫酸法测定荚膜多糖的最优条件。