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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

犬β-防御素cBDl03的原核表达和纯化

作者: 朱骞 包银莉 秦海斌 宋珍华 贺星亮 温海 高一龙    公安部南京警犬研究所警犬技术公安部重点实验室 江苏南京210012 南京农业大学动物医学院 江苏南京210095

关键词: 犬阻防御素103 原核表达 纯化

摘要:将犬β-防御素103(canine β-defensin103,cBD103)基因亚克隆至原核表达栽体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-cBD103,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达后,利用Ni-NTA亲和层析纯化该蛋白,并用肠激酶酶切融合蛋白,SDS-PAGE鉴定表达产物和纯化产物。结果表明,质粒pET-cBD103经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,大肠埃希菌中成功表达出目的蛋白,蛋白大小约为24ku,以可溶性表达为主。经过纯化和酶切,得到大小8ku的cBD103,与预期大小一致。该研究在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,为下一步大规模制备cBD103奠定了基础。


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