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耐氟喹诺酮类药物禽源大肠埃希菌gyrA基因的检测分析
作者: 卢琴 罗青平 张腾飞 汪宏才 罗玲 王红琳 温国元 张蓉蓉 邵华斌 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 湖北武汉430064 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 湖北武汉430064 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 湖北武汉430064
关键词: 禽源大肠埃希菌 氟喹诺酮 耐药菌株 gyrA基因
摘要：探讨不同禽源大肠埃希菌中喹诺酮类药物的耐药情况及耐药基因gyrA的分布和突变特征。采用K-B药敏纸片法、gyrA基因的PCR扩增,对9株大肠埃希菌进行喹诺酮类药物试验,并将gyrA基因的PCR产物测序,对测序结果采用DNA MAN、DNA Star、MEGA6等软件分析。药敏试验结果表明,C1、C2、C3菌株对左氧沙星、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星敏感,D1、D2、D3、B1、B2和B3菌株对左氧沙星、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星均表现为耐药和中介;gyrA基因的测序结果表明,除B1菌株有1处核苷酸突变位点和B2菌株有14处核苷酸突变位点;B2菌株gyrA基因的氨基酸突变发生在87位Ile→Val替代、101位Leu→Met替代、102位Ala→Ser替代、129位Lys→Gln替代。9株禽源大肠埃希菌的同源性和进化树分析表明,不同禽源耐氟喹诺酮类药物的大肠埃希菌菌株中B2菌株gyrA基因与其他9株菌株相比,同源性在90%左右,进化树不在一个分支上,研究中的B2菌株将为大肠埃希菌的氟喹诺酮类耐药机制的研究提供候选菌株。
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