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传染性造血器官坏死病毒焦磷酸测序检测技术的建立
作者: 尹伟力 刘瑶 倪杨帆 张四化 岳志芹 孙涛 烟台出入境检验检疫局 山东烟台264000 荣成出入境检验检疫局 山东荣成264300 武汉市农业检测中心 湖北武汉430003 武汉市动物疫病预防控制中心 湖北武汉430003 山东出入境检验检疫局技术中心 山东青岛266000
关键词: 传染性造血器官坏死病毒 焦磷酸测序 检测
摘要：根据传染性造血器官坏死病毒（IHNV）基因序列,设计了IHNV最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了IHNV焦磷酸测序检测方法。对所构建的IHNV焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测。结果表明,所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行IHNV检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RTPCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。