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小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立
作者: 孙雨 赵柏林 王晓英 董浩 翟新验 曲萍 胡冬梅 杨天意 石慧 宋晓晖 中国动物疫病预防控制中心 北京102600
关键词: 小反刍兽疫 N活性蛋白 可溶性表达与纯化 间接酶联免疫吸附试验
摘要：小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白，也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白，并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法，通过优化密码子、优化表达条件等条件探索，在大肠埃希菌表达系统中获得了高效表达的可溶性N蛋白，进一步基于N蛋白建立了间接ELISA检测方法，该方法对其他相关的羊类病原无交叉反应，其组内与组间变异系数均低于9％，具有良好的重复性。对480份临床血清样品进行检测，同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较，符合率达到98．33％。本研究为进一步开发成熟的小反刍兽疫抗体检测试剂盒奠定了基础。
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