牛副流感病毒3型抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

作者: 杨建乐 [1,2] ; 赵贵民 [2] ; 侯佩莉 [2] ; 王洪梅 [2] ; 李杰 [1] ; 何洪彬 [2]

关键词: 牛副流感病毒3型 NP-HN基因原核表达酶联免疫吸附试验抗体检测

摘要：旨在建立牛副流感病毒3型（BPIV3）抗体间接ELISA检测方法。克隆NP-HN截短串联基因并构建原核表达载体pET28a（＋）-NP-HN,诱导纯化NP-HN重组蛋白作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立BPIV3抗体间接ELISA检测方法,进一步与病毒中和试验和进口ELISA试剂盒进行比较,应用本方法对270份临床血清样本进行了检测。结果表明,表达的NP-HN重组蛋白大小为44ku,具有良好的反应原性,建立的ELISA检测方法特异性强,与牛的主要呼吸道病原如牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数小于8%,与病毒中和试验和进口商品化ELISA试剂盒的总符合率分别为96.67%和98.89%。对采自山东、辽宁和天津的270份临床血清样本检测后总的阳性率为82.59%（223/270）。建立的BPIV3抗体间接ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可应用于BPIV3的流行病学调查和抗体检测研究。

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牛副流感病毒3型抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

作者: 杨建乐 [1,2] ; 赵贵民 [2] ; 侯佩莉 [2] ; 王洪梅 [2] ; 李杰 [1] ; 何洪彬 [2]

关键词: 牛副流感病毒3型 NP-HN基因 原核表达 酶联免疫吸附试验 抗体检测

关键词: 牛副流感病毒3型 NP-HN基因原核表达酶联免疫吸附试验抗体检测