两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建

作者: 范丹丹 [1] ; 张毅 [2] ; 刘琳琳 [3] ; 王冬冬 [1] ; 王建琳 [1] ; 徐守振 [1] ; 毕玉海 [4] ; 尹燕博 [1]

关键词: H9N2亚型禽流感病毒强致病性反向遗传感染性克隆

摘要：为研究H9N2亚型禽流感病毒毒株对禽类致病性的分子致病机制,选用A/chicken/Shandong/818/2010和A/chicken/Shandong/196/2011两株致病力存在明显差异的野生型H9N2亚型禽流感病毒,用RT-PCR扩增其全基因组序列,并将其全部克隆于PHW2000双向转录/表达载体。经测序验证后,将其转入293T细胞,并拯救出2株具有血凝活性的毒株。对拯救毒株进行全基因组测序验证后,结果表明拯救出的毒株与2株野生型病毒的核苷酸序列完全一致;体外试验证明,拯救毒株与野生毒株在鸡胚和细胞中的复制能力一致;动物试验证明,拯救毒株保持了野生型毒株对鸡和鸡胚的致病力。这两套反向遗传操作系统的构建,研究了病毒变异规律,发现了可能导致H9N2亚型禽流感病毒增强的关键氨基酸位点,为流感的监测及预防提供依据。

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两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建

作者: 范丹丹 [1] ; 张毅 [2] ; 刘琳琳 [3] ; 王冬冬 [1] ; 王建琳 [1] ; 徐守振 [1] ; 毕玉海 [4] ; 尹燕博 [1]

关键词: H9N2亚型禽流感病毒 强致病性 反向遗传 感染性克隆

关键词: H9N2亚型禽流感病毒强致病性反向遗传感染性克隆