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低血清培养PK-15细胞及其增殖猪圆环病毒2型的研究
作者: 张瑞永 [1,2] ; 管宇 [2] ; 吴信明 [2] ; 梅建国 [2] ; 姚春阳 [2] ; 沈志强 [2] ; 雷连成 [1]
关键词: PK-15细胞 低血清培养基 猪圆环病毒2型 增殖 间接免疫荧光
摘要：依次采用含60、30、20、10mL/L血清浓度的低血清培养基驯化PK-15细胞,并给驯化好的细胞上接种猪圆环病毒2型（PCV-2）,以确定PCV-2在该培养体系下的生长情况。结果用含60、30、20mL/L血清浓度的低血清培养基各进行3代次驯化,PK-15细胞能完全适应且生长状态良好;当血清浓度降至10mL/L时,传代1次细胞无法保持良好状态,细胞出现贴壁较差、生长停滞等现象。各血清浓度培养体系中细胞生长曲线测定结果显示,在细胞培养的0、24、48、72、96h各组细胞密度与常规培养的对照组差别不明显。因此用该低血清培养体系培养PK-15细胞时,血清最低添加量为20mL/L。用该体系培养的PK-15细胞接种PCV-2后,通过荧光抗体染色测定病毒滴度。结果显示,低血清培养的PCV-2病毒滴度为106.5TCID50/mL,与常规条件培养的PCV-2对照（病毒滴度为106.375 TCID50/mL）差别不明显,表明该体系可用于PCV-2的增殖。表明研究建立了PK-15细胞低血清培养PCV-2体系,为PCV-2的相关研究奠定了基础。