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兔骨髓间充质干细胞的分离培养及肝内示踪
作者: 张芙蓉 [1] ; 屠慧渭 [1] ; 钱波 [1] ; 孙何 [1] ; 金立方 [1]
关键词: 骨髓间充质干细胞 兔 分离 示踪 增强型绿色荧光蛋白
摘要:通过分离培养兔骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),示踪其肝内移植命运,为MSCs的细胞治疗肝脏疾病提供理论依据和试验支持。采取全骨髓贴壁培养法分离培养兔骨髓MSCs,利用携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体感染MSCs,选择最优转染效率,并移植入经D﹣氨基半乳糖诱导的急性/亚急性肝衰竭受体兔体内,荧光显微镜下直接观察EGFP阳性细胞在肝内分布。分离出兔骨髓来源的MSCs,在体外可稳定传代,并具有成骨和成脂的分化潜能;慢病毒可高效感染MSCs;移植后第3、7、15天在肝功能衰竭的受体兔肝组织内可见GFP阳性细胞。携带EGFP的慢病毒载体具有高效转染兔MSCs的能力,并可作为报告基因简单有效示踪MSCs的肝内分布。
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